简介：

D-荧光素是噻唑类杂环化合物，是ー种依赖腺苷三磷酸（ATP)生物发光反应的底物，生物发光的原理是荧光素在ATP和氧存在条件下被荧光素酶氧化，D-荧光素与强碱反应生成荧光素盐，易溶于水。其化学反应式如下：ATP+D-Luciferin+02→Oxyluciferin+AMP+PPi+0,+Light。荧光素/荧光素酶的生物发光反应常用于ATP、能转化为 ATP的代谢物（如AMP、ADP、cAMP)和能产生ATP的酶（如肌酸激酶等）的检测，因此生物发光反应可应用于广泛范围内生物材料的检测。近几十年来ATP生物发光技术得到了很大的发展，已经在細胞増殖、生物量计数等方面广泛应用。由于 ATP生物发光技术无需培养过程，操作简便、灵敏度高，数分钟内可得到結果，具有其它微生物检测方法无法比拟的优势，是目前检测微生物 的方法。除此之外，荧光素酶基因可作为报告基因，在分子生物学上有广泛的应用。因此荧光素/荧光素酶生物发光反应具有很大的市场，D-荧光素作为生物发光反应的底物，随着ATP生物发光反应试剂需求的増加，其需求量越来越大。

作用机制：
D-荧光素的作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。

体内机理:  荧光素酶( Luc ) 催化底物D-荧光素，利用ATP和Mg2+作为辅因子，氧气存在下发射一典型的黄绿光，之后在体内37°C下迁移到红光。

体外机理∶  很多因素都可能影响反应灵敏性，包括温度、pH或底物浓度。建议使用pH 7.8的缓冲液，并且使用前将所有试剂预热到室温。建议反应缓冲液内添加过量的ATP和Mg2+以达到反应状态。

应用：

D-荧光素是一种依赖腺苷三磷酸(ATP)生物发光反应的底物。荧光素/荧光素酶的生物发光反应常用于ATP、能转化为ATP的代谢物(如AMP、ADP、cAMP)和能产生ATP的酶(如肌酸激酶等)的检测，普遍应用于整个生物技术领域，尤其是体内活体成像技术。 

活性：
D-Luciferin(Fireflyluciferin)是一种流行的ATP存在下生物发光的底物，用作基于荧光素酶的生物发光成像和基于细胞的高通量筛选。

研究：
D-luciferin与荧光素酶，ATP和氧气反应而发光，通过敏感感光胶片对光进行检测，从而使碱性磷酸酶结合的抗体可视化。