EC109(食管癌细胞)资料信息介绍:
产品名称:EC109食管癌细胞
型号:HTX2576
生长特性:贴壁
组织来源:食管癌细胞
培养基:89%DMEM+10%FBS+1%双抗
规格:2X10^6 cells
培养温度:37℃
引种来源:ATCC、*、ECACC、sciencell
传代:1:2~1:4传代,两天左右换液。
冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)。
包装:专业的无菌保温运输包装。
如需EC109(食管癌细胞)详细资料、照片及细胞培养操作说明欢迎联系。
细胞发货方式:
复苏后发货:细胞复苏后发货,一周左右到货,免运输费用(气温较好建议用复苏后发货的方式)。
冻存发货:需加干冰运输费用,选择干冰运输的发两管细胞,每管细胞数量2X10^6 cells,货期2-3天(气温低于0℃须冻存发货)。
细胞发货采用专业的包装,用 捷的空运快递运输方式免费送货上门。
EC109(食管癌细胞)收货处理方法:
贴壁生长的细胞:
1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开包装T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。
3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。
5、如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。
悬浮生长的细胞:
1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货,拆开包装离心管的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
2、然后用显微镜观察细胞状态。
3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。
4、平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清。
5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。
EC109(食管癌细胞)在发货前质检:
细胞活性检测;真菌、细菌、霉菌检测;支原体、衣原体等检测。
售后服务:
1、EC109细胞为三代内,活体。运输途中细胞出现污染和状态不好,可提供完全免费补发。
2、实验过程中若客户培养出导致细胞问题,仅需支付物流耗材费用,可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3、细胞在培养过程中,华拓生物可以提供技术支持。
产品特性:EC109(食管癌细胞)目前细胞状态稳定,华拓细胞提供细胞培养操作指南及常见问题分析,并能提供完善的技术支持和售后服务。
EC109食管癌细胞培养常见注意事项:
1、收货时,如不能在收到细胞后及时操作处理细胞,T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,需即刻复苏细胞;T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上,再开始处理细胞,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
2、部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍在加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。< 次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。
3、细胞培养,细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5% CO2,湿度 环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件。细胞于培养瓶或皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3mm即可)。
4、EC109(食管癌细胞)传代,细胞培养至密度达80%以上时即可传代,传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代;传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险;细胞状态不好或者生长比较慢时,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度;细胞碎片较多、背景较脏时,贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心(900rpm,3min)能有效改善;建议不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化,也可以联系咨询我们。
5、贴壁细胞在消化时,因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样,不能完全规定消化时间,以科研人员经验为准。 对于消化这步,如果对该细胞经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间,建议可以按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,然后每隔30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,把细胞打散后,离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。注意消化时间,不要过度,细胞变圆可以吹下来即可终止。
6、细胞冻存时,部分长得比较慢的细胞,冻存的细胞密度要稍微大点,以防止复苏后生长困难;冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度;冻存时建议设置冻存检测,即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果,冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一;细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即冻存时温度不能急剧下降,应控制温度缓慢下降,复苏时应快速融化,融化后尽快加入培养基中。
7、推荐冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)。降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。
8、EC109(食管癌细胞)复苏步骤:
提前5分钟准备37摄氏度的无菌水(提前一天灭菌1L水备用,倒出300ml 微波炉稍微加热,调整到37摄氏度 );将冻存管放入37摄氏度水中,上部分用收捏住,不要让盖缝处浸入水中,摇晃冻存管,尽可能在1分钟内融化细胞(不要超过2分钟,间期时不时拿出看下,待细胞融化到剩下小粒冰状物,停止水浴);冻存管离心900rpm 1分钟,管壁喷75%乙醇消毒,待乙醇挥发后,无菌操作吸取上清冻存液体丢弃,补加1ml培养基混匀,加入到培养瓶(T25)接种并补加培养基37摄氏度培养。