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hRPE(视网-膜色素上皮细胞)
  • 品牌:ATCC、ScienCell、华拓细胞库
  • 产地:中国/进口
  • 型号:2x10^6 cells
  • 货号:HTX2484
  • 价格: ¥1000/株
  • 发布日期: 2019-11-13
  • 更新日期: 2024-05-24
产品详请
产地 中国/进口
保存条件 37摄氏度培养
品牌 ATCC、ScienCell、华拓细胞库
货号 HTX2484
用途 科研
组织来源
细胞形态 见资料
是否是肿瘤细胞
规格 2x10^6 cells
保质期 一年
器官来源
免疫类型 见资料
品系 见说明
生长状态 贴壁
物种来源
是否进口

hRPE(视网膜色素上皮细胞)介绍:

细胞名称:hRPE视网膜色素上皮细胞

产品货号:HTX2484

规格:2X10^6 cells

生长状态:贴壁

组织来源:视网膜色素上皮细胞

完全培养基:89%1640+10%FBS+1%双抗

培养环境:空气(Air),95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃

引种来源:ATCC、*、ECACC、sciencell等

传代比例:1:2~1:4传代,两天左右换液。

包装:专业的无菌保温运输包装。

如需hRPE(视网膜色素上皮细胞)详细资料、照片及细胞培养操作说明欢迎联系。



hRPE(视网膜色素上皮细胞)发货方式:

复苏后发货:细胞复苏后发货,一周左右到货,免运输费用(气温较好建议用复苏后发货的方式)。

冻存发货:需加干冰运输费用,选择干冰运输的发两管细胞,每管细胞数量2X10^6 cells,货期2-3天(气温低于0℃须冻存发货)。

细胞发货采用专业的包装,用便捷的空运快递运输方式免费送货上门。


hRPE(视网膜色素上皮细胞)收货处理方法:

贴壁生长的细胞:

1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开包装T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。

2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。

3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。

5、如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。


悬浮生长的细胞:

1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货,拆开包装离心管的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。

2、然后用显微镜观察细胞状态。

3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。

4、平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清。

5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。


hRPE(视网膜色素上皮细胞)在发货前质检:

活性检测;真菌、细菌、霉菌检测;支原体、衣原体等检测。


售后服务:

1、hRPE细胞为三代内,活体。运输途中细胞出现污染和状态不好,可提供完全免费补发。

2、实验过程中若客户培养出导致细胞问题,仅需支付物流耗材费用,可重新发货。其他根据情况灵活处理。

3、细胞在培养过程中,华拓生物可以提供技术支持。

hRPE(视网膜色素上皮细胞)目前细胞状态稳定,华拓细胞提供细胞培养操作指南及常见问题分析,并能提供完善的技术支持和售后服务。

hRPE视网膜色素上皮细胞培养常见注意事项:

1、hRPE(视网膜色素上皮细胞)收货时,如不能在收到细胞后及时操作处理细胞,T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,需即刻复苏细胞;T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上,再开始处理细胞,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

2、细胞培养,细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5% CO2,湿度 环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件。细胞于培养瓶或皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3mm即可)。

4、hRPE(视网膜色素上皮细胞)传代,细胞培养至密度达80%以上时即可传代,传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的细胞可以按1:2传代;传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险;细胞状态不好或者生长比较慢时,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度;细胞碎片较多、背景较脏时,贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞吹散后离心,离心转速和时间(900rpm,3-5min)能有效改善;建议不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化,也可以联系咨询我们。

5、贴壁细胞在消化时,因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样,不能完全规定消化时间,以科研人员经验为准。 对于消化这步,如果对该细胞经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间,建议可以按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,然后每隔30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,把细胞打散后,离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。注意消化时间,不要过度,细胞变圆可以吹下来即可终止。

6、hRPE(视网膜色素上皮细胞)细胞冻存时,部分长得比较慢的细胞,冻存的细胞密度要稍微大点,以防止复苏后生长困难;冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度;冻存时建议设置冻存检测,即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果,冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一;细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即冻存时温度不能急剧下降,应控制温度缓慢下降,复苏时应快速融化,融化后尽快加入培养基中。

7、冻存液:推荐92%FBS+8%DMSO或者92%完全培养基+8%DMSO(也可以根据实验室条件自行选择)。降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。

8、hRPE(视网膜色素上皮细胞)复苏步骤:

提前5分钟准备37摄氏度的无菌水(提前一天灭菌1L水备用,倒出300ml 微波炉稍微加热,调整到37摄氏度 );将冻存管放入37摄氏度水中,上部分用收捏住,不要让盖缝处浸入水中,摇晃冻存管,尽可能在1分钟内融化细胞(不要超过2分钟,间期时不时拿出看下,待细胞融化到剩下小粒冰状物,停止水浴);冻存管离心900rpm 1分钟,管壁喷75%乙醇消毒,待乙醇挥发后,无菌操作吸取上清冻存液体丢弃,补加1ml培养基混匀,加入到培养瓶(T25)接种并补加培养基37摄氏度培养。