hRPE(视网膜色素上皮细胞)介绍：

细胞名称：hRPE视网膜色素上皮细胞

产品货号：HTX2484

规格：2X10^6 cells

生长状态：贴壁

组织来源：视网膜色素上皮细胞

完全培养基：89%1640+10%FBS+1%双抗

培养环境：空气（Air），95%；二氧化碳（CO2）,5%；37℃

引种来源：ATCC、*、ECACC、sciencell等

传代比例：1：2~1：4传代，两天左右换液。

包装：专业的无菌保温运输包装。

如需hRPE(视网膜色素上皮细胞)详细资料、照片及细胞培养操作说明欢迎联系。

hRPE(视网膜色素上皮细胞)发货方式：

复苏后发货：细胞复苏后发货，一周左右到货，免运输费用（气温较好建议用复苏后发货的方式）。

冻存发货：需加干冰运输费用，选择干冰运输的发两管细胞，每管细胞数量2X10^6 cells，货期2-3天（气温低于0℃须冻存发货）。

细胞发货采用专业的包装，用便捷的空运快递运输方式免费送货上门。

hRPE(视网膜色素上皮细胞)收货处理方法：

贴壁生长的细胞:

1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货，收到细胞后，拆开包装T25瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷75%酒精消毒。

2、消毒后用显微镜观察细胞状态，并拍下细胞照片。

3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。

5、如细胞密度高于80%，可以直接消化传代，相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。

悬浮生长的细胞:

1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货，拆开包装离心管的自封袋，不拆封口膜，表面喷75%酒精消毒。

2、然后用显微镜观察细胞状态。

3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。

4、平衡完成后，离心（1000rpm，3min）收集细胞，弃上清。

5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。

hRPE(视网膜色素上皮细胞)在发货前质检：

活性检测；真菌、细菌、霉菌检测；支原体、衣原体等检测。

售后服务：

1、hRPE细胞为三代内，活体。运输途中细胞出现污染和状态不好，可提供完全免费补发。

2、实验过程中若客户培养出导致细胞问题，仅需支付物流耗材费用，可重新发货。其他根据情况灵活处理。

3、细胞在培养过程中，华拓生物可以提供技术支持。

hRPE(视网膜色素上皮细胞)目前细胞状态稳定，华拓细胞提供细胞培养操作指南及常见问题分析，并能提供完善的技术支持和售后服务。

hRPE视网膜色素上皮细胞培养常见注意事项：

1、hRPE(视网膜色素上皮细胞)收货时，如不能在收到细胞后及时操作处理细胞，T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升华，需即刻复苏细胞；T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上，再开始处理细胞，平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

2、细胞培养，细胞请于细胞培养箱中培养，大部分细胞是37℃，5% CO2，湿度 环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致，请仔细阅读相应的细胞说明书，使用正确的培养基及培养条件。细胞于培养瓶或皿中培养，加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基（一般液面高度2-3mm即可）。

4、hRPE(视网膜色素上皮细胞)传代，细胞培养至密度达80%以上时即可传代，传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的细胞可以按1:2传代；传代后，建议不要使用传代前培养所使用的培养基，会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险；细胞状态不好或者生长比较慢时，可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度；细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞吹散后离心，离心转速和时间（900rpm，3-5min）能有效改善；建议不要随意更换培养基，因实验需要，可以逐步驯化，也可以联系咨询我们。

5、贴壁细胞在消化时，因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样，不能完全规定消化时间，以科研人员经验为准。 对于消化这步，如果对该细胞经验不多，无法准确掌控胰酶作用时间，建议可以按照下述操作：胰酶首先复温到室温后加入细胞，然后每隔30秒，即吹打下细胞，如果能够吹打散细胞，加入完全培养基终止消化，把细胞打散后，离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ，如果30秒吹打不下，再等30秒重复操作。注意消化时间，不要过度，细胞变圆可以吹下来即可终止。

6、hRPE(视网膜色素上皮细胞)细胞冻存时，部分长得比较慢的细胞，冻存的细胞密度要稍微大点，以防止复苏后生长困难；冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO，同时浓度不要太高，部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡，所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度；冻存时建议设置冻存检测，即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中，与正常体积冻存的细胞共同冻存，至液氮后复苏检查冻存结果，冻检合格前，留一部分细胞继续培养，以防万一；细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则，即冻存时温度不能急剧下降，应控制温度缓慢下降，复苏时应快速融化，融化后尽快加入培养基中。

7、冻存液：推荐92%FBS+8%DMSO或者92%完全培养基+8%DMSO（也可以根据实验室条件自行选择）。降温步骤：4度10min，-20度2h，-80过夜后液氮保存。

8、hRPE(视网膜色素上皮细胞)复苏步骤：

提前5分钟准备37摄氏度的无菌水（提前一天灭菌1L水备用，倒出300ml 微波炉稍微加热，调整到37摄氏度 ）；将冻存管放入37摄氏度水中，上部分用收捏住，不要让盖缝处浸入水中，摇晃冻存管，尽可能在1分钟内融化细胞（不要超过2分钟，间期时不时拿出看下，待细胞融化到剩下小粒冰状物，停止水浴）；冻存管离心900rpm 1分钟，管壁喷75%乙醇消毒，待乙醇挥发后，无菌操作吸取上清冻存液体丢弃，补加1ml培养基混匀，加入到培养瓶（T25）接种并补加培养基37摄氏度培养。