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SW480[SW-480](人结肠腺癌细胞)
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  • 供货能力:100
  • 最低订购量:1支
  • 可销售总数量:100支
  • 发布日期: 2019-08-02
  • 更新日期: 2019-08-02
产品详细说明
品牌: ATCC 产地: 中国/进口
英文名称: SW-480 保存条件: 见说明书
货号: HTX1674 保质期: 见说明书 个月

SW480[SW-480]人结肠腺癌细胞介绍:

SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌,而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp和直肠抗原3阴性;角蛋白阳性;p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代,309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代;细胞p53蛋白表达水平升高;癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性;未检测到癌基因N-myc的表达;不表达Matrilysin(一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶)。


细胞名称: SW480 [SW-480]人结肠腺癌细胞

组织来源: 结肠腺癌,人结肠腺癌细胞

培养基: 89%L15+10%FBS+1%双抗

SW480 [SW-480]细胞产品介绍:

发货方式:

复苏后发货:我们复苏细胞后发货,货期一周左右,免运费。(气温较好建议复苏后发货)

冻存发货(干冰运输):需额外增加干冰运费,选择干冰运输的我们发两管细胞,为了保证客户接种可靠性多发一管。(气温低于0℃须冻存发货)

细胞发货采取专业的运输包装,并选择最快捷的运输方式(顺丰速运或其他空运快递)

本公司细胞引种来源:ATCC、DSMZ、ECACC、武大细胞库、上海生化细胞所、中国科学院典型培养物保藏委员会等


细胞处理方法:

一、贴壁细胞

1、 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。

2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。

3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。

4、37度平衡1-2小时。

5、用移液管吸取培养基,到50ml离心管中,剩下细胞密度达到80%至90%可以传代,如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。

6、如果肉眼检查上清有细胞,对50ml上清进行离心收集细胞,如果细胞连片状态,弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化(1ml胰酶37度),接种培养。


二、悬浮细胞

1、接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。

2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。

3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。

4、细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。

5、1000rpm,5min 离心,用吸管小心吸出上清,加入培养基,重悬细胞。

6、将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种,加入新鲜培养基,置于 37℃,5%CO2 培养(大部分细胞)。


细胞在发货前进行质检:

1、细胞存种的活性检测

2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检

3、衣原体、支原体检测(荧光法、培养法等)


产品质量保证及售后:

1、 细胞为三代以内,活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好,我们完全免费重新发货。

2、 实验过程中若确定是客户问题,客户仅需支付物流和耗材费用,我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。

3、 产品使用过程中,华拓生物可提供技术上的指导。


SW480 [SW-480]细胞培养常见注意事项:

1、收货时,如不能在收到细胞后及时操作处理细胞,T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,需即刻复苏细胞;T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上,再开始处理细胞,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

2、贴壁细胞在消化时,因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样,不能完全规定消化时间,以科研人员经验为准。 对于消化这步,如果对该细胞经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间,建议可以按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,然后每隔30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,把细胞打散后,离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。注意消化时间,不要过度,细胞变圆可以吹下来即可终止。

3、传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代;传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险;细胞状态不好或者生长比较慢时,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度;细胞碎片较多、背景较脏时,贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心(900rpm,3min)能有效改善;建议不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化,也可以联系咨询我们。

4、SW480 [SW-480]细胞冻存时,部分长得比较慢的细胞,冻存的细胞密度要稍微大点,以防止复苏后生长困难;冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度;冻存时建议设置冻存检测,即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果,冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一;细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即冻存时温度不能急剧下降,应控制温度缓慢下降,复苏时应快速融化,融化后尽快加入培养基中。