AE-210130 大鼠肺炎病毒（PV）ELISA试剂盒Rat pneumonia virus (PV) Elisa kit, 96 tests
原理：
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。本试剂盒应用夹心法测定标本中大鼠肺炎病毒（PVM）表达。用纯化的大鼠肺炎病毒（PVM）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中肺炎病毒（PVM）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与 HRP 标记的肺炎病毒（PVM）抗体结合，形成抗体抗原 酶标抗体复合物，经过 洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成 终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与 CUTOFF 值相比较，从而判定标本中大鼠肺炎病毒（PVM）的存在与否。

操作步骤：
步骤1. 每次预稀释阳性血清、预稀释阴性血清各100μl，对照(仅含样品稀释剂)，以及在复孔中含有 pneumonia virus (PV)(根据需要稀释)的样品。轻轻混合并在37℃孵育30min。
步骤2. 抽吸并清洗三次微孔板。在所有孔中加入100ul的酶结合物，轻轻搅拌，37℃孵育30min。
步骤3.  抽吸并清洗三次微孔板。在所有孔中加入50微升的每种基质A和B溶液，轻轻混合，在黑暗中室温下孵育10分钟。
步骤4.  将50μl的终止液放入每孔中，轻轻混合(蓝色变为黄色)。在A630 nm处测量OD。